La Galleria si trova all'interno del Palazzo fatto costruire nel Cinquecento dal cardinale Girolamo Capodiferro. Successivamente l'edificio divenne di proprietà del cardinale Bernardino Spada, il quale commissionò poi a Borromini alcuni rinnovamenti che resero al Palazzo l'aspetto attuale, tra i quali la celebre Galleria Prospettica, che crea nello spettatore, con particolari accorgimenti, l'illusione di una lunghezza maggiore del reale. Lo Stato ne divenne infine proprietario nel 1927. Fu proprio il cardinale Spada a dare inizio alla collezione di opere che oggi possiamo osservare nella Galleria, incrementata di anno in anno dai suoi successori. La collezione è costituita in prevalenza da quadri databili tra il XVI e XVIII secolo tra cui segnaliamo opere di Guido Reni (Ritratto del Cardinale Bernardino Spada), il Ritratto di violinista di Tiziano, il Davide con la testa di Golia Orazio Gentileschi e tele di Parmigianino, Carracci e Artemisia Gentileschi.

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